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　　醫(yī)用清洗劑酶活力是衡量清洗劑中酶成分活性強(qiáng)弱的關(guān)鍵指標(biāo)，具體指單位劑量清洗劑中的酶在規(guī)定實(shí)驗(yàn)條件下，分解特定底物的速率或分解量，直接體現(xiàn)酶類(lèi)成分對(duì)目標(biāo)污垢的降解能力。酶作為醫(yī)用清洗劑的核心去污成分，活力不足會(huì)導(dǎo)致清洗劑無(wú)法有效分解醫(yī)療器械表面的有機(jī)污垢，即便后續(xù)滅菌處理也難以完全消除污染隱患，而通過(guò)醫(yī)用清洗劑酶活力檢測(cè)，既能幫助生產(chǎn)企業(yè)把控每一批次產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定性，及時(shí)發(fā)現(xiàn)生產(chǎn)、儲(chǔ)存過(guò)程中酶活力衰減問(wèn)題，也能為醫(yī)療機(jī)構(gòu)提供客觀的產(chǎn)品選擇依據(jù)，保障復(fù)用醫(yī)療器械的清洗質(zhì)量，從源頭降低醫(yī)療安全風(fēng)險(xiǎn)。

　　醫(yī)用清洗劑酶活力檢測(cè)步驟詳解

　　（1）蛋白酶活力檢測(cè)（福林-酚法）

　　原理：蛋白酶催化酪蛋白水解生成含酚羥基的氨基酸，在堿性條件下與福林-酚試劑反應(yīng)生成藍(lán)色化合物，通過(guò)分光光度計(jì)在680nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算酶活力。

　　關(guān)鍵步驟：

　　樣品預(yù)處理：將醫(yī)用清洗劑按1:100稀釋?zhuān)苽涿敢簶悠罚?/p>

　　反應(yīng)體系：加入0.5mL酶液、1mL酪蛋白底物（10g/L），40℃水浴保溫10分鐘；

　　終止反應(yīng)：加入2mL三氯乙酸溶液（0.4mol/L），靜置10分鐘后離心；

　　顯色與檢測(cè)：取上清液1mL，加入5mL碳酸鈉溶液（0.4mol/L）和1mL福林-酚試劑，40℃顯色20分鐘，測(cè)定吸光度。

　　結(jié)果判定：以每分鐘催化生成1μg酪氨酸所需的酶量為1個(gè)活力單位（U），計(jì)算樣品的酶活力值，需符合產(chǎn)品標(biāo)注值的±10%范圍。

　　（2）脂肪酶活力檢測(cè)（滴定法）

　　原理：脂肪酶催化橄欖油水解生成脂肪酸，用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定脂肪酸，根據(jù)消耗的堿液體積計(jì)算酶活力。

　　關(guān)鍵步驟：

　　底物制備：將橄欖油與阿拉伯膠溶液按1:3比例混合，高速攪拌制成乳化液；

　　反應(yīng)體系：加入5mL乳化底物、2mL酶液（1:50稀釋?zhuān)?0℃水浴保溫30分鐘；

　　終止與滴定：加入10mL乙醇-乙醚混合液（1:1）終止反應(yīng)，滴加2滴酚酞指示劑，用0.05mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至粉紅色。

　　結(jié)果判定：以每分鐘催化生成1μmol脂肪酸所需的酶量為1個(gè)活力單位（U），樣品活力需≥產(chǎn)品標(biāo)注值的90%。

　　（3）淀粉酶活力檢測(cè)（碘量法）

　　原理：淀粉酶催化淀粉水解生成麥芽糖，剩余淀粉與碘液反應(yīng)生成藍(lán)色復(fù)合物，通過(guò)滴定剩余碘的量計(jì)算酶活力。

　　關(guān)鍵步驟：

　　反應(yīng)體系：加入2mL淀粉底物（20g/L）、1mL酶液（1:200稀釋?zhuān)?0℃水浴保溫15分鐘；

　　終止反應(yīng)：加入1mL鹽酸溶液（1mol/L），冷卻至室溫；

　　滴定：加入0.5mL碘液（0.1mol/L），用0.05mol/L硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至藍(lán)色褪去。

　　結(jié)果判定：以每分鐘催化1mg淀粉水解所需的酶量為1個(gè)活力單位（U），樣品活力需符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的最低限值（≥30U/mL）。