化妝品體內(nèi)哺乳動(dòng)物細(xì)胞微核試驗(yàn)方法是什么
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2025.10.24
化妝品體內(nèi)哺乳動(dòng)物細(xì)胞微核試驗(yàn)主要是通過檢測(cè)動(dòng)物骨髓或外周血紅細(xì)胞中微核的形成情況,評(píng)估化妝品是否引起成紅細(xì)胞染色體或有絲分裂器的損傷。微核是細(xì)胞分裂時(shí),染色體片段或整條染色體因損傷而未能正常進(jìn)入子細(xì)胞核,在細(xì)胞質(zhì)中形成的圓形或橢圓形小體。通過檢測(cè)動(dòng)物特定細(xì)胞(如骨髓嗜多染紅細(xì)胞)中的微核數(shù)量,可間接反映受試物對(duì)染色體的損傷程度,進(jìn)而評(píng)估其潛在致突變風(fēng)險(xiǎn)。

化妝品體內(nèi)哺乳動(dòng)物細(xì)胞微核試驗(yàn)方法
1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:常規(guī)選擇小鼠或大鼠,小鼠體重一般為25g-30g,大鼠體重為150g-200g。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房應(yīng)符合國家相應(yīng)規(guī)定。
2.劑量分組:一般取受試物L(fēng)D50的1/2、1/5、1/10、1/20等劑量,以求獲得微核的劑量-反應(yīng)關(guān)系曲線。當(dāng)受試物的LD50大于5g/kg體重時(shí),可取5g/kg體重為最高劑量,一般至少設(shè)3個(gè)劑量。每個(gè)劑量組10只動(dòng)物,雌、雄性各半。另外,還應(yīng)設(shè)溶劑對(duì)照和陽性物對(duì)照組,常用環(huán)磷酰胺作為陽性物對(duì)照,劑量可為40mg/kg體重。
3.染毒途徑和方式:染毒途徑視實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?,建議采用經(jīng)口灌胃方式。采用30h兩次給藥法,即兩次給受試物間隔24h,第二次給受試物后6h取材。
4.骨髓的制?。簞?dòng)物頸椎脫臼處死后,打開胸腔,沿著胸骨柄與肋骨交界處剪斷,剝掉附著其上的肌肉,擦凈血污,橫向剪開胸骨,暴露骨髓腔,然后用止血鉗擠出骨髓液。
5.涂片:將骨髓液滴在載玻片一端的小牛血清液滴里,仔細(xì)混勻。一般來講,兩節(jié)胸骨髓液涂一張片子為宜。然后,按血常規(guī)涂片法涂片,長度約2cm-3cm,在空氣中晾干。
6.固定:將干燥的涂片放入甲醇液中固定5min。即使當(dāng)日不染色,也應(yīng)固定后保存。
7.染色:將固定過的涂片放入Giemsa應(yīng)用液中,染色10min-15min,然后立即用1/15mol/L磷酸鹽緩沖液沖洗。
8.封片:用濾紙及時(shí)擦干染片背面的水滴,再用雙層濾紙輕輕按壓染片,以吸附染片上殘留的水分,再在空氣中晃動(dòng)數(shù)次,以促其盡快晾干,然后放入二甲苯中透明5min,取出滴上適量光學(xué)樹脂膠,蓋上蓋玻片,寫好標(biāo)簽。
9.觀察與計(jì)數(shù):先用低倍鏡,后用高倍鏡粗略檢查,選擇細(xì)胞分布均勻,細(xì)胞無損,著色適當(dāng)?shù)膮^(qū)域,再在油浸鏡下計(jì)數(shù)。每只動(dòng)物至少計(jì)數(shù)1000個(gè)嗜多染紅細(xì)胞。微核率指含有微核的嗜多染紅細(xì)胞數(shù),以千分率(‰)表示之。若一個(gè)嗜多染紅細(xì)胞中出現(xiàn)兩個(gè)或兩個(gè)以上微核,仍按一個(gè)有微核細(xì)胞計(jì)數(shù)。
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電話:400-133-6008
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郵箱:atc@gic.ac.cn
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化妝品去角質(zhì)功效測(cè)試方法有哪些化妝品去角質(zhì)功效測(cè)試主要是為了加強(qiáng)對(duì)化妝品安全性和功效性的管理。2022 年 1 月 1 日起,國家藥監(jiān)局開始實(shí)施《化妝品功效宣稱評(píng)價(jià)規(guī)范》。該規(guī)范要求在中華人民共和國境內(nèi)生產(chǎn)經(jīng)營的化妝品,應(yīng)當(dāng)按照規(guī)范進(jìn)行功效宣稱評(píng)價(jià)。其中明確指出,具有去角質(zhì)等功效的化妝品,需要通過文獻(xiàn)資料調(diào)研、研究數(shù)據(jù)分析或者化妝品功效宣稱評(píng)價(jià)試驗(yàn)等手段,對(duì)其功效宣稱內(nèi)容進(jìn)行科學(xué)測(cè)試和合理評(píng)價(jià)。這一政策的實(shí)施,促使化妝品生產(chǎn)企業(yè)在產(chǎn)品上市前需對(duì)去角質(zhì)功效及安全性進(jìn)行嚴(yán)格評(píng)價(jià),確保產(chǎn)品的功效宣稱真實(shí)、準(zhǔn)確、科學(xué)。 -
化妝品去角質(zhì)功效測(cè)試步驟:從樣品準(zhǔn)備到數(shù)據(jù)評(píng)估化妝品去角質(zhì)功效測(cè)試的主要目的是通過科學(xué)方法驗(yàn)證產(chǎn)品對(duì)皮膚角質(zhì)層的影響,確保產(chǎn)品宣稱的有效性。通過功效評(píng)價(jià)試驗(yàn)評(píng)估產(chǎn)品去除老化角質(zhì)的能力,確保其宣稱的"去角質(zhì)"功效真實(shí)有效。?確保產(chǎn)品成分符合安全標(biāo)準(zhǔn),避免過度刺激或損傷皮膚屏障,例如限制酸類物質(zhì)的添加量和使用范圍。根據(jù)《化妝品功效宣稱評(píng)價(jià)規(guī)范》,所有去角質(zhì)化妝品需通過科學(xué)驗(yàn)證才能使用相關(guān)功效宣稱,防止虛假宣傳。







































